Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6161-91 

 

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА 

В ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика вещества 

 

// \ C H N Cl. 

Cl--C // \ C--NH 5 8 5 

¦ ¦¦ 2 

¦ ¦¦ М.м. 173,61. 

N \\ / N 

\\ /C 

¦ 

/ \ 

H C CH 

3 3 

 

2-Амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазин (АДХТ) - метаболит и полупродукт синтеза грамекса. Белое кристаллическое вещество без запаха с Т пл. 210 - 211 °C. Растворимость в воде - 0,049% (25 °C), ацетоне - 1,94%, хлороформе - 0,34%. 

ПДК в воде водоемов - 0,02 мг/куб. дм. 

 

2. Методика определения 

2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воде 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Метод основан на экстракции АДХТ из воды хлороформом с последующим определением газожидкостной (ГЖХ) и тонкослойной (ТСХ) хроматографией. Минимально детектируемое количество с помощью пламенно-ионизационного детектора 0,01 мкг, минимально обнаруживаемое количество на тонкослойных хроматограммах 1 мкг. Предел обнаружения АДХТ в воде 0,008 мг/л (ТСХ) и 0,006 мг/л (ГЖХ). 

2.1.2. Избирательность метода 

Определению АДХТ не мешают другие триазины - полупродукты производства пестицидов - производных сульфанилмочевин. 

2.1.3. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице. 

 

Таблица 

 

Метод
определения 

Предел
обнаружения,
мг/л  

Процент
определения,
%  

Средняя квадратичн.
ошибка определения,
мкг  

Доверительный
интервал
(p = 0,95,
n = 10)  

ГЖХ  

0,006  

65  

+/- 1,1  

+/- 0,8  

ТСХ  

0,008  

72  

+/- 0,44  

+/- 0,3  

 

2.2. Реактивы и растворы 

 

Ацетон чда, ТУ 6-08-3513-75. 

Бензол чда, ГОСТ 5955-75. 

Натрий сернокислый б/в, ч, ГОСТ 4106-76. 

Этиловый эфир уксусной кислоты чда, ГОСТ 22300-76. 

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75. 

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-37-9-83. 

Лимонная кислота осч, ТУ 6-09-584-75. 

Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76. 

Калий иодистый чда, ГОСТ 4232-74. 

Крахмал растворимый чда, ГОСТ 10163-76. 

Дистиллированная вода, ТУ 6-09-2502-77. 

Калий марганцовокислый чда, ГОСТ 20490-75, 3-процентный водный раствор. 

Хлористоводородная кислота хч, ГОСТ 18290-72, 12-процентный водный раствор. 

Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66. 

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77. 

Силикагель КСК N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72. 

Силикагель ЛС 5/40 для тонкослойной хроматографии с 13% гипса (Хемапол, ЧССР). 

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол" (Хемапол, ЧССР). 

Гидроксид натрия хч, ГОСТ 4328-77. 

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74. 

Хроматон N-AW, 0,20 - 0,25 мм, с 5% XE-60. 

Хромосорб W-HP, 80/100 меш, с 3% OV-17. 

 

2.3. Приборы и посуда 

 

Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором ("Цвет-106" и т.п.). 

Мерные колбы на 25 и 100 мл, ГОСТ 1770-74. 

Аппарат для встряхивания, ТУ 69-1-081-73. 

Водяная баня, ТУ 46-22-60375. 

Электроплитка, ТУ 92-275-76. 

Стеклянные пластинки, 15 х 15 см. 

Сито капроновое, 100/120 меш. 

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок. 

Камера для обработки пластинок, ТУ 10565-63. 

Эксикатор, ГОСТ 6371-73. 

Сушильный шкаф, ТУ 69-1-1411-76. 

Делительная воронка на 500 мл, ГОСТ 100054-75. 

Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10М. 

Фарфоровая ступка. 

Ротационный испаритель. 

Стеклянный водоструйный вакуумный насос, МРТУ 42961-64. 

Весы лабораторные ВЛА-200М. 

Колбы конические НШ, ГОСТ 1170-74. 

 

2.4. Отбор проб 

 

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за N 2051-79. 

 

2.5. Подготовка к определению 

 

2.5.1. Приготовление пластинок с тонким слоем силикагеля для ТСХ 

35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100/120 меш, смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды в фарфоровой ступке или на аппарате для встряхивания в течение 15 минут. Около 10 г сорбционной массы наносят на стеклянную пластинку 15 х 15 см и, покачивая, равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат на воздухе в горизонтальном положении при комнатной температуре 12 часов и затем активируют в сушильном шкафу при 190 °C в течение 30 минут. Хранят в эксикаторе над слоем хлористого кальция. При использовании для приготовления пластинок силикагеля ЛС 14 г этого силикагеля смешивают с 38 мл дистиллированной воды. На одну пластинку наносят 5 - 7 г сорбционной массы и далее поступают так, как это описано выше. 

2.5.2. Приготовление стандартного раствора 

Стандартный раствор АДХТ в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в мерной колбе на 100 мл. 

2.5.3. Приготовление проявляющих реактивов для ТСХ 

Проявляющий реактив N 1: 

раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,4 г бромфенолового синего и доводят до метки дистиллированной водой; 

раствор N 2 - в мерную колбу на 100 мл помещают 2 г. азотнокислого серебра и доводят до метки дистиллированной водой; 

пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты. 

Проявляющие растворы при хранении в плотно закрытых склянках без доступа света годны для применения в течение месяца. 

Проявляющий реактив N 2: 

раствор N 1 - в мерную колбу на 25 мл помещают 0,25 г иодистого калия и доводят до метки дистиллированной водой; 

раствор N 2 - 0,75 г растворимого крахмала заваривают в 25 мл дистиллированной воды и затем охлаждают; 

пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2. 

Проявляющий реактив готовят перед употреблением. 

2.5.4. Построение градуировочного графика для определения АДХТ методом ГЖХ 

Для построения градуировочного графика в пробы воды (250 мл) вносят 1,5; 2,5; 5,0 и 7,5 мкг АДХТ в виде раствора в ацетоне и далее осуществляют извлечение АДХТ из проб и хроматографирование так, как описано в п. 2.6.2. Хроматографирование одной пробы проводят дважды, измеряют на хроматограммах высоты пиков АДХТ и строят график зависимости высоты пика АДХТ от его содержания в воде. Полученные данные обрабатывают по методу наименьших квадратов и получают уравнение калибровочного графика в виде: 

 

H = A + B x X, 

 

где: 

H - высота пика АДХТ на хроматограмме, мм; 

X - содержание АДХТ в воде, мг/л; 

A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов. 

 

2.6. Описание определения 

 

2.6.1. Тонкослойная хроматография 

Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку, доводят pH до 8 с 

помощью 1М водного раствора гидроксида натрия и трижды экстрагируют 

хлороформом (3 x 25 мл). Объединенный хлороформный экстракт сушат над 

безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1 часа при 

периодическом перемешивании и удаляют растворитель на ротационном 

испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 1 мл. Остаток 

количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем 

силикагеля (могут быть использованы пластинки, приготовленные в 

лабораторных условиях, и пластинки "Силуфол"). На эту же пластинку наносят 

стандартные количества (1 и 2 мкг) АДХТ в виде раствора в ацетоне и 

проводят хроматографирование в системе растворителей этилацетат - хлороформ 

(1:1) в хроматографической камере, насыщенной в течение 2 часов парами 

подвижных растворителей. Для насыщения стенки камеры обкладывают 

фильтровальной бумагой, которая пропитывается смесью подвижных 

растворителей. После окончания процесса хроматографирования пластинку 

извлекают из камеры и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Для обнаружения 

АДХТ пластинку обрабатывают смесью N 1 и N 2 (1:1) и затем 4-процентным 

водным раствором лимонной кислоты. АДХТ обнаруживается в виде синих пятен 

на желтом фоне с величиной R = 0,61 +/- 0,05. 

Для повышения надежности идентификации АДХТ хроматографирование может 

быть также проведено в системе растворителей ацетон - бензол (3:2). Для 

обнаружения АДХТ пластинку предварительно помещают в эксикатор (камера для 

хлорирования) на 2 минуты, на дно которого наливают смесь (1:1) 

3-процентного водного раствора марганцовокислого калия и 12-процентного 

водного раствора хлористоводородной кислоты (камера насыщается парами хлора 

через 5 - 10 минут после помещения в нее растворов марганцовокислого калия 

и хлористоводородной кислоты). Затем пластинку вынимают из эксикатора, 

помещают в вытяжной шкаф на 40 минут для удаления паров хлора и 

обрабатывают проявляющим реактивом N 2. АДХТ обнаруживается в виде синих 

пятен на светло-голубом фоне с величиной R = 0,82 +/- 0,05 (пластинки 

"Силуфол"). 

2.6.2. Газожидкостная хроматография 

Извлечение АДХТ из пробы воды проводят так, как это описано в п. 2.6.1. Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1 часа при периодическом перемешивании и удаляют растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 0,5 мл. Остаток растворителя удаляют потоком теплого воздуха досуха и сухой остаток количественно переносят ацетоном (~ 1 мл) в градуированную центрифужную пробирку. Потоком теплого воздуха упаривают содержимое пробирки до 0,2 мл и вводят в хроматограф 2 мкл. 

Условия хроматографирования (хроматограф "Цвет-106" с пламенным 

ионизационным детектором): стеклянная колонка (длина 1 м, внутренний 

диаметр 3 мм), заполненная хромосорбом W-HP с 3% OV-17; температура 

термостата колонки и испарителя 150 и 260 °C соответственно; скорость 

газа-носителя (азот особой чистоты) через колонку 40 мл/мин., шкала 

-12 

электрометра 10 x 10 А, скорость диаграммной ленты потенциометра 240 

мм/час. Время удерживания АДХТ в этих условиях 6 минут. Для повышения 

надежности идентификации АДХТ может быть использовано хроматографическое 

определение на колонке (длина 2 м, внутренний диаметр 3 мм), заполненной 

хроматоном N-AW с 5% XE-60. Температура термостата колонки 180 °C, 

остальные условия хроматографирования те же. Время удерживания АДХТ в этом 

случае 4 минуты 26 сек. 

Содержание АДХТ в воде определяют с помощью предварительно построенного калибровочного графика. 

 

2.7. Обработка результатов анализа 

 

Содержание АДХТ в пробах при определении с помощью тонкослойной хроматографии рассчитывают по формуле: 

 

10 x A 

X = -------, 

V x P 

 

где: 

X - содержание в пробе АДХТ, мг/л; 

A - количество АДХТ в анализируемом объеме пробы, мг; 

V - объем пробы, мл; 

P - процент определения, % (см. табл.). 

Количественную оценку АДХТ на хроматограммах проводят путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартных растворов или по величине площади пятен по формуле: 

 

A - A 

2 1 

A = A - ------- x (S - S), 

2 S - S 2 

2 1 

 

где: 

A, S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятна АДХТ в анализируемой 

пробе; 

A , A , S и S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятен стандартных 

1 2 1 2 

растворов АДХТ с большим и меньшим содержанием по сравнению с анализируемой 

пробой. 

Величину площади пятен определяют, накладывая на пластинку прозрачную бумагу или кальку; очерчивают контур пятна, переносят его на миллиметровку и подсчитывают число кв. мм, входящих в контур. 

Содержание АДХТ в пробах (X, мг/л) при определении с помощью газожидкостной хроматографии рассчитывают по формуле: 

 

H - A 

X = -----, 

 

где: 

H - высота пика АДХТ на хроматограмме анализируемой пробы, мм (среднее значение из двух параллельных определений). 

 

3. Требования безопасности 

 

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе в химических лабораториях. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru