Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6152-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-АМИНО-4,6-ДИМЕТИЛ-1,3-ПИРИМИДИНА 

В ВОДЕ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

2-Амино-4,6-диметил-1,3-пиримидин (аминопиримидин) является полупродуктом получения препаратов "Анкор-5" и "Анкор-85", рекомендуемых в качестве гербицидов, и представляет собой тонкодисперсный порошок светло-серого и белого цвета. 

Структурная формула: 

 

N___________CH 

// \\ 3 

NH // \\ 

2\ / 

\______/ 

N-----------CH 

 

Эмпирическая формула С H N . 

6 9 3 

Молекулярная масса 123,0. 

Растворяется в воде, метаноле, этаноле, метиленхлориде и хлороформе. 

ЛД для крыс - 970 мг/кг. 

50 

ОБУВ аминопиримидина для воды - 20 мкг/л. 

 

2. Методика определения аминопиримидина 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Определение основано на извлечении анализируемого вещества из воды, насыщенной NaCl, экстракцией метиленхлоридом, концентрировании вещества упариванием растворителя и последующем определении его методом жидкостной хроматографии с УФ-детектором (226 нм) на колонке, заполненной насадкой "Силасорб-600". 

2.1.2. Избирательность метода 

Метод обеспечивает полную селективность. Определению не мешают полупродукты получения. 

2.1.3. Метрологическая характеристика метода 

Диапазон измеряемых концентраций аминопиримидина в воде от 10 до 50 мкг/л. 

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 2 мкг. 

Нижний предел измерения в воде 10 мкг/л. 

Суммарная погрешность не превышает 11,40%. 

Время выполнения определения (включая отбор образца) аминопиримидина в одной пробе при одновременной подготовке двух параллельных образцов 3 часа. 

 

2.2. Реактивы, растворы и материалы 

 

Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-82. 

Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76. 

Метилен хлористый техн., ТУ 6-09-2662-77. 

Спирт этиловый, ГОСТ 5963-67. 

Спирт изопропиловый хч, ТУ 6-09-402-81. 

Гептан нормальный эталонный, ГОСТ 5.395-70. 

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72. 

Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 61-75. 

Раствор 1:10 в изопропиловом спирте. 

Бумага индикаторная универсальная. 

Окись бария ч, ГОСТ 10203-78. 

Натрий хлористый чда, ГОСТ 4233-77. 

2-Амино-4,6-диметил-1,3-пиримидин с установленным содержанием не ниже 98%. 

 

2.3. Приборы, аппаратура, посуда 

 

Жидкостный хроматограф Милихром с УФ-детектором, ТУ 25-05-2095-77. 

Потенциометр ЛКСУ-003, ТУ 25-05-2095-77. 

Колонка металлическая 6,3 см с внутренним диаметром 2 мм, заполненная силикагелем "Силосорб-600", с размером частиц 5 мкм. 

Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74. 

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл, 50 мл и 25 мл. 

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10, 5, 2 мл с делениями. 

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, вместимостью 1000 мл. 

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106. 

Колбы грушевидные, ГОСТ 9737-70, вместимостью 50 мл. 

Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82. 

Чашка фарфоровая, ГОСТ 9147-73, вместимостью 250 мл. 

Холодильник Х111-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82. 

Линейка измерительная, цена деления 1 мм, ГОСТ 4272-75. 

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76. 

Регулятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ 25-111378-77. 

Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ 9871-61. 

Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена деления 1 °C. 

Секундомер механический СОП-пр.2а3-000, ГОСТ 5072-79. 

Барометр БК-75, ТУ 35-04-223-75, цена деления 0,1 кПа. 

Весы аналитические лабораторные общего назначения, тип ВЛА-200М, ТУ 25-06-1049-72. 

Весы лабораторные технические ВЛКТ-500М, 4-ый класс, ГОСТ 24104-80. 

Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82. 

Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82. 

Шкаф сушильный электрический 2В-151, ТУ 64-1-1411-76. 

Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ 7148-70. 

 

2.4. Отбор пробы 

 

Отбор пробы воды производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными зам. Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 N 2051-79. Объем средней пробы должен составлять 2 л. 

 

2.5. Подготовка к определению 

 

2.5.1. Подготовка колонки и элюента 

Для кондиционирования колонки через нее пропускают 6 мл элюента со скоростью 200 мкл/мин. 

Для приготовления элюента смешивают гептан, метанол, изопропанол, хлороформ и уксусную кислоту (1:10 в изопропиловом спирте) в соотношении 60:5,5:3,5:1,5:0,1 по объему. 

Метанол перед употреблением сушат окисью бария (0,5 л метанола - 50 г окиси бария), фильтруют и перегоняют. 

2.5.2. Подготовка стандартных и градуировочных растворов 

Стандартные растворы аминопиримидина 500 мкг/мл - раствор N 1. 

Стандартный раствор используют для приготовления из него градуировочных растворов. Для этого 25 мг аминопиримидина взвешивают в мерной колбе вместимостью 50 мл на аналитических весах, записывая результат до четвертого знака. 

После растворения аминопиримидина в хлористом метилене доводят объем до метки, тщательно перемешивая содержимое колбы, и рассчитывают концентрацию стандартного раствора с учетом чистоты вещества. 

Стандартный раствор N 1 используют для приготовления стандартного раствора N 2. Для этого 10 мл раствора N 1 помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем до метки хлористым метиленом. 

Концентрация раствора N 2 соответствует 50 мкг/мл. 

Для приготовления воды с известным содержанием аминопиримидина готовят стандартный раствор N 3. Для этого 1 мл раствора N 1 помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем до метки этанолом. Концентрация раствора N 3 соответствует 10 мкг/мл. 

Затем, используя стандартный раствор N 2, готовят градуировочные растворы в хлористом метилене: 

N 4 - 10 мкг/мл; 

N 5 - 20 мкг/мл; 

N 6 - 30 мкг/мл; 

N 7 - 40 мкг/мл; 

N 8 - 50 мкг/мл. 

Стандартные растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 1 месяца при условиях, исключающих испарение раствора. 

Способ приготовления градуировочных растворов из стандартного раствора N 2 представлен в таблице 1. 

 

Таблица 1 

 

Номер
градуировочного
раствора  

Стандартный раствор
N 2 (50 мкг/мл), мл 

Растворитель
хлористый
метилен, мл  

Концентрация
градуиров. раствора,
мкг/мл  

4  

5,00  

20,00  

10,00  

5  

10,00  

15,00  

20,00  

6  

15,00  

10,00  

30,00  

7  

20,00  

5,00  

40,00  

8  

25,00  

-  

50,00  

 

2.5.3. Построение градуировочного графика 

Для градуировки прибора вводят в хроматограф по 10 мкл каждого градуировочного раствора не менее 3-х раз, измеряют высоту пика линейкой и строят градуировочный график зависимости высоты пика от массовой концентрации аминопиримидина в градуировочном растворе. При данной градуировке необходимо провести измерение коэффициента экстракции аминопиримидина из воды. Коэффициент экстракции определяют по отношению высоты пика аминопиримидина (экстракт из воды с дозированным количеством аминопиримидина - раствор N 3) к высоте пика аминопиримидина градуировочного раствора с той же концентрацией. При использовании градуировочного графика, построенного на основании данных, полученных после экстракции, вводить коэффициент экстракции в расчетную формулу не требуется. 

 

2.6. Описание определения 

 

2.6.1. Экстракция 

500 мл анализируемой воды помещают в делительную воронку вместимостью 1000 мл, насыщают ее NaCl (150 г). Проводят экстракцию 3 x 50 мл хлористым метиленом в течение 1 мин. Объединенные экстракты переносят в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл, фильтруя через бумажный фильтр, смоченный хлористым метиленом. Раствор упаривают порциями в круглодонной колбе вместимостью 50 мл с дефлегматором (10 - 12 см) при температуре бани 60 +/- 5 °C (рис. 1 - не приводится). Затем баню убирают и проводят охлаждение установки до комнатной температуры. Через дефлегматор в колбу наливают 0,5 мл хлористого метилена. Колбу снимают, сушат образец на воздухе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл хлористого метилена, тщательно ополаскивая стенки колбы. Полученный раствор хроматографируют. 

2.6.2. Условия хроматографирования 

Анализируемый экстракт, подготовленный, как было изложено выше, в количестве 10 мкл вводят с помощью дозирующего устройства в колонку хроматографа и записывают хроматограмму не менее 3-х раз. 

Проводят определение высоты пика и фиксируют среднее из трех определений. 

Хроматограмма ацетонового экстракта представлена на рис. 2 (не приводится). 

Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб 

Длина колонки, см 6,3 

Внутренний диаметр колонки, мм 2,0 

Насадка колонки Силосорб-600 

зернением 5 мкм 

Скорость потока элюента через колонку, мкл/мин. 200 

Скорость диаграммной ленты, мм/час 600 

Диапазон чувствительности 0,4 - 0,8 

Объем вводимой пробы, мкл 10 

Объем удерживания, мкл 1000 

Линейный диапазон определения, нг 20,0 - 100,0 

Длина волны УФ-детектора, нм 226 

 

2.7. Обработка результатов анализа 

 

Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 30,00 мкг/мл проводят коррекцию градуировочной прямой. 

Расчет содержания анализируемого вещества в пробе воды проводится по высоте пика методом соотношения со стандартом по формуле: 

 

C x h x v x K x a 

X = -----------------, 

hгр х V х в 

 

где: 

X - содержание аминопиримидина, мкг/л; 

C - концентрация анализируемого вещества в градуировочном растворе, мкг/мл; 

hгр и h - высоты пиков на хроматограммах градуировочного раствора и экстракта, мм; 

v - объем экстракта после растворения остатка, мл; 

a - объем градуировочного раствора, введенного в хроматограф, мкл; 

в - объем пробы экстракта, введенный в хроматограф, мкл; 

V - объем пробы воды, взятой для анализа, л; 

K - коэффициент, учитывающий потери при концентрировании. 

Примечание: 

Коэффициент K находят после анализа проб воды, содержащих определенное количество анализируемого вещества по формуле: 

 

А внесено 

K = ------------. 

А обнаружено 

 

3. Требования безопасности 

 

При проведении анализов необходимо выполнять правила техники безопасности при работе со стеклом, электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической лаборатории. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru