Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6172-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНОКСАПРОП-ЭТИЛА (ФУРОРЕ-СУПЕР) В ВОДЕ, 

ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ ПШЕНИЦЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

Фуроре-супер - пума-супер. Хое 046360. 

Химическое название: (D+)-этил-(4-(6-хлор-2-бензоксазолилокси)фенокси)-пропионат. 

 

N CH 

// \ /\\ --- ¦ 3 

¦ ¦¦ \\---O---// \\--O-CH-C-OC H C H ClNO . 

¦ ¦¦ // \ ___ / \\ 2 5 18 16 5 

/\\ / \// --- O 

Cl O М.м. 361,8. 

 

Бесцветное кристаллическое вещество, температура плавления 

84,5 °C, растворимость в воде 0,7 мг/л, растворим в этаноле, 

н-гексане, циклогексане, легко растворим в ацетоне, толуоле, 

-9 

этилацетате. Давление паров при 20 °C 5,3 x 10 гПа; летучесть 

-5 

при 20 °C 7,8 x 10 мг/куб. м. 

Основной метаболит фуроре - (D+)-2-(4-(6-хлор-2- 

бензоксазолилокси)фенокси)-пропионовая кислота (Хое 088406). 

 

N CH 

// \ /\\ --- ¦ 3 

¦ ¦¦ \\---O---// \\---O--CH-C-OH C H ClN. 

¦ ¦¦ / \ ___ / \\ 16 12 

/\\ / \ / --- O 

Cl O М.м. 333,7. 

 

Продукт гидролиза фуроре - 6-хлор-2,3-дигидробензоксазол-2-он 

(Хое 054014). 

 

¦ C H ClNO . 

N 7 4 2 

// \ /\\ 

¦ ¦¦ \\C=O М.м. 169,6. 

¦ ¦¦ / 

/\\ / \ / 

Cl O 

 

Хроматографируемое ГЖХ производное фуроре - 3-ацетил-6-хлор- 

2,3-дигидробензоксазол-2-он (Хое 083312). 

 

H C-C=O 

3 ¦ C H ClNO . 

N 9 6 3 

// \ /\\ 

¦ ¦¦ \\C=O М.м. 211,6. 

¦ ¦¦ / 

/\\ / \ / 

Cl O 

 

2. Методика определения фуроре-супер в окружающей среде 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Определение основано на извлечении препарата органическими растворителями, очистке экстрактов активированным углем и последующем анализе методом реакционной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) на неподвижной фазе XE-60 с детектором по захвату электронов (ДЭЗ или ДПР) или хроматографировании в тонком слое (ТСХ) пластинок "Силуфол" с обнаружением препарата по реакции с 2,6-дибром-N-хлорхинонимином или бромфеноловым синим. 

2.1.2. Метрологическая характеристика 

Метрологическая характеристика определения фуроре приведена в таблице 2.1. 

 

Таблица 2.1 

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРОРЕ 

ТОНКОСЛОЙНОЙ И РЕАКЦИОННОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ 

(P = 0,95, N = 5 - 7) 

 

TTTTT 

¦ Исследуемый ¦Метод¦ Предел ¦ Среднее ¦ Стандарт. ¦Доверительный¦ 

¦ объект ¦ ¦обнаружения,¦ значение ¦отклонение, %¦ интервал, % ¦ 

¦ ¦ ¦мг/л, мг/кг ¦определения,¦ ¦ ¦ 

¦ ¦ ¦ ¦ % ¦ ¦ ¦ 

+++++++ 

¦Вода ¦ТСХ ¦0,0005 ¦90 ¦9,3 ¦14,9 ¦ 

¦-"- ¦ГЖХ ¦0,0025 ¦72 ¦5,4 ¦5,7 ¦ 

¦Почва ¦ТСХ ¦0,05 ¦84 ¦12,6 ¦17,3 ¦ 

¦-"- ¦ГЖХ ¦0,05 ¦75 ¦8,1 ¦13,0 ¦ 

¦Зеленая масса¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

¦растений ¦ТСХ ¦0,1 ¦91 ¦17,1 ¦21,4 ¦ 

¦Пшеница ¦ТСХ ¦0,2 ¦84 ¦12,7 ¦8,5 ¦ 

L+++++ 

 

2.1.3. Избирательность метода 

Рекомендуемые в методике условия очистки экстрактов, применение метода ТСХ с избирательным проявляющим реагентом 2,6-дибром-N-хлорхинонимином или метода реакционной ГЖХ дают возможность идентифицировать исследуемое соединение в присутствии хлор-, фосфорсодержащих пестицидов, триазинов, производных фенилмочевины, синтетических пиретроидов. 

 

2.2. Реактивы и растворы 

 

Общие для ТСХ и ГЖХ 

Ацетон, чда, ТУ 6-09-3313-86. 

Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78. 

Бензол, хч, ГОСТ 5955-81. 

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74. 

Хлороводородная кислота, хч, ГОСТ 3118-77, концентрированная. 

Активированный уголь марки ОУ-"А". 

Вода дистиллированная. 

Натрия сульфат безводный, хч, ГОСТ 4166-81. 

Фильтры бумажные беззольные "красная лента", ТУ 6-09-1678-77. 

Фильтры бумажные беззольные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77. 

Фуроре-супер (98%). 

Основной стандартный раствор фуроре-супер (ОСР): 10 мг фуроре-супер растворяют в 100 мл ацетона (100 мкг/мл). Хранить в холодильнике не более 3-х месяцев. 

К методу ГЖХ 

Неподвижная фаза 3% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS. 

Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллоне с редуктором. 

Трифторуксусный ангидрид, ТУ 6-09-4135-75. 

Пиридин, ч, ГОСТ 13647-78. 

Рабочие стандартные растворы фуроре-супер 10, 5, 2 мкг/мл готовят разведением ОСР ацетоном. Хранить в холодильнике не более 2-х недель. 

Хроматографируемое производное фуроре (Хое 083312), хч. 

Основной стандартный раствор Хое 083312 100 мкг/мл в ацетоне. 

Рабочие стандартные растворы Хое 083312 2, 1, 0,5 мкг/мл готовят разведением ОСР раствора Хое 083312 ацетоном. (При отсутствии Хое 083312 стандарт хроматографируемого производного фуроре готовят одновременно с анализируемым образцом, гидролизуя и ацилируя рабочие стандартные растворы фуроре.) 

К методу ТСХ 

Стандартные пластинки "Силуфол" (Хемапол, Чехословакия) или отечественные пластинки "Армсорб". 

Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-3719-83. 

Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-81. 

Кислота лимонная, ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор (или уксусная ледяная кислота, хч, ГОСТ 18270-72, 10-процентный водный раствор). 

2,6-дибром-N-хлорхинонимин, хч, ТУ 6-09-06-951-79. 

Едкое кали, ч, ГОСТ 9285-78. 

Проявляющие реагенты: 

1. Реагент на основе бромфенолового синего (БФС): в 10 мл ацетона растворяют 0,05 г БФС и доводят до 100 мл 1-процентным раствором нитрата серебра в водном ацетоне (ацетон - вода 3:1). Хранят в темной склянке. 

Через 5 мин. после опрыскивания хроматограмму обрабатывают 2-процентным раствором лимонной или 10-процентным раствором уксусной кислоты. 

2. Реагент на основе 2,6-дибром-N-хлорхинонимина: пластинку после хроматографирования нагревают в течение 10 мин. при 150 °C, a затем опрыскивают свежеприготовленным 0,5-процентным раствором 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в н-гексане и сразу же обрабатывают 0,5-процентным водным раствором едкого кали. 

 

2.3. Приборы, аппаратура, посуда 

 

Общие для ТСХ и ГЖХ 

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73. 

Баня водяная электрическая, ТУ 64-1-2850-76. 

Весы аналитические лабораторные, ГОСТ 19491-74. 

Весы технические ВЛКТ-500 г М. 

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76. 

Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75. 

Колбы грушевидные на шлифах емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72. 

Колбы плоскодонные конические емкостью 50, 100, 250 мл, ГОСТ 1770-74. 

Колбы мерные емкостью 100, 250 мл, ГОСТ 1770-74. 

Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74. 

Воронки делительные емкостью 250, 500 мл, ГОСТ 8613-81. 

Воронки химические, 0,60 мм, ГОСТ 8613-81. 

Пипетки емкостью 0,1, 1, ГОСТ 1770-74. 

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71. 

К методу ГЖХ 

Газовый хроматограф серии "Цвет" или аналогичный с ДЭЗ (ДПР). 

Колбонагреватели для круглодонных колб (50 мл) или электроплита с закрытой спиралью и терморегулятором. 

Холодильник Либиха 200 - 400 мм, ГОСТ 9499-70. 

Колбы грушевидные емкостью 25, 50 мл, ГОСТ 10394-72. 

Пробирки мерные емкостью 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74. 

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М, ТУ 2-833-106. 

Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 см. 

Секундомер, ГОСТ 5772-79. 

Термометр ртутный на 200 °C, ГОСТ 16590-71. 

К методу ТСХ 

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-74, или аналогичная. 

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74. 

Камера для опрыскивания - колпак для насосов с кнопкой диаметром 160 - 200 мм, высотой 220 мм, ТУ 25-11-1022-75. 

Капиллярные пипетки для нанесения проб. 

 

2.4. Проведение определения 

 

2.4.1. Отбор проб 

Отбор проб производят в соответствии с требованиями, изложенными в "Унифицированных правилах отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденных заместителем Главного государственного санитарного врача СССР (N 2051-79 от 21.08.79). 

2.4.2. Экстракция 

2.4.2.1. Вода. 200 мл воды помещают в делительную воронку, подкисляют концентрированной хлористоводородной кислотой до pH = 4 - 5 и экстрагируют фуроре-супер хлороформом, предварительно насыщенным водой, 3 раза по 30 мл, осторожно встряхивая по 3 - 4 минуты. Объединенный хлороформный экстракт отфильтровывают в колбу для отгонки растворителей через обезжиренный ватный тампон (или бумажный фильтр "красная лента") с помещенным на него слоем безводного сульфата натрия (15 г). Отгоняют хлороформ на ротационном испарителе под вакуумом при температуре водяной бани не более 45 °C до ~= 0,5 мл. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Далее проводят определение, как описано в п. 2.4.3. 

2.4.2.2. Почва. 50 г почвы помещают в коническую колбу, заливают 100 мл ацетона и экстрагируют 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр "красная лента" в делительную воронку емкостью 500 мл. Экстракцию повторяют дважды с 30 мл растворителя в течение 15 мин., экстракты объединяют в делительной воронке. 

Для очистки к полученному ацетоновому экстракту приливают дистиллированной воды (по объему примерно в два раза больше, чем объем экстракта) и экстрагируют препарат хлороформом трижды по 50, 30, 30 мл, осторожно встряхивая 3 - 4 мин. 

Объединенный хлороформный экстракт отфильтровывают в колбу для отгонки растворителей через обезжиренный ватный тампон (или бумажный фильтр "красная лента") с помещенным на него слоем безводного сульфата натрия (15 г) и концентрируют на ротационном вакуумном испарителе до 0,5 мл. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Далее проводят очистку активированным углем, как описано в п. 2.4.2.3. 

2.4.2.3. Растительный материал (зеленая масса пшеницы) 

Измельченные листья или зеленые колоски пшеницы (20 г) экстрагируют 50 мл смеси гексан - ацетон 9:1 в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе и проводят очистку активированным углем. 

Для проведения очистки сухой остаток растворяют в 10 мл смеси бензол - ацетон 1:3 и добавляют 0,1 г активированного угля, хорошо перемешивают. Колбу опускают в стакан с горячей водой (60 °C) на 20 мин., затем раствор отфильтровывают через фильтр "красная лента" в колбу для отгонки растворителей. Уголь дважды промывают смесью бензол - ацетон 1:3 по 5 мл, присоединяют смывы к фильтрату. Объединенный фильтрат упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не более 40 °C. 

2.4.2.4. Пшеница. Из измельченного до 1 - 2 мм зерна (навеска 25 г) экстрагируют смесью ацетон - вода (1:1) на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Дают отстояться 15 - 20 мин. и сливают растворитель, фильтруя через фильтр "красная лента". Промывают пробу дважды смесью ацетон - вода (1:1) по 20 мл, энергично встряхивая и давая отстояться по 20 мин. Объединяют отфильтрованные экстракт и смывы, переносят в делительную воронку и прибавляют 80 мл воды. Экстрагируют гексаном трижды по 50 мл, сливая верхний (гексановый) слой через безводный сульфат натрия (10 - 15 г на фильтровальной воронке с обезжиренной ватой) в колбу для отгонки. Упаривают растворитель под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C до ~= 0,5 мл, остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, берут аликвоту (0,1 - 0,2 мл) и проводят определение методом ТСХ, как описано в п. 2.4.3.1. 

2.4.3. Хроматографический анализ 

2.4.3.1. Определение методом ТСХ 

Полученный после упаривания сухой остаток растворяют в 1,0 мл 

ацетона или диэтилового эфира, аликвоту этого раствора (0,1 мл) 

количественно наносят на хроматографическую пластинку. Справа и 

слева от пробы наносят рабочие стандартные растворы фуроре (0,2 - 

15 мкг). Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, в 

которую за 30 мин. до хроматографирования наливают смесь 

растворителей н-гексан - ацетон 3:1. После того как подвижная фаза 

поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры, дают 

растворителю испариться и обрабатывают либо проявляющим реагентом 

N 1 (на основе БФС), либо реагентом N 2 (на основе 

2,6-дибром-N-хлорхинонимина). Фуроре и его кислотное производное 

проявляются обоими реагентами в виде голубых пятен. R фуроре 0,6 

(идет с фронтом), R кислотного производного фуроре 0,3. 

Реагент N 2 специфичнее и чувствительнее реагента N 1. Предел обнаружения препарата реагентом N 1 - 1 мкг, реагентом N 2 - 0,2 мкг на пластинке. 

Количество фуроре в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятна пробы и стандарта. Пропорциональная зависимость между концентрацией и площадью пятна соблюдается в интервале 0,2 - 20 мкг. 

Содержание фуроре (X) в пробе вычисляют по формуле: 

 

A x V 

X = ------, 

P x V 

 

где: 

X - количество фуроре в пробе, мг/кг (мг/л); 

A - количество фуроре, найденное путем сравнения со 

стандартными растворами препарата, мг; 

V - общий объем анализируемой пробы, мл; 

V - объем аликвоты, мл; 

P - масса пробы, взятой для анализа, кг (л). 

2.4.3.2. Определение методом реакционной ГЖХ 

Получение производного 

Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, отбирают аликвоту <*> (0,1 - 0,5 мл), прибавляют 1 мл трифторуксусного ангидрида, 100 мкл пиридина, присоединяют колбу к обратному холодильнику и нагревают в течение 3 часов на колбонагревателе при температуре 130 °C. Затем отсоединяют колбу от холодильника и после того, как она остынет, отдувают остаток ангидрида током азота. К остатку в колбе прибавляют 1 мл бензола, 9 мл дистиллированной воды и переносят все в мерную пробирку. Для анализа методом ГЖХ отбирают аликвоту (1 - 3 мкл) из верхнего бензольного слоя. 

-------------------------------- 

<*> Примечание: при определении в воде берут всю пробу. 

 

Условия ГЖХ анализа 

Измерения проводят на хроматографе с ДЭЗ (ДПР). 

Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 мм. 

Фаза 3% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS. 

Температура колонки - 160 °C, испарителя - 200 °C, детектора - 230 °C. 

Скорость газа-носителя азота 65 мл/мин. 

Скорость продувочного газа (ДПР) азота 150 мл/мин. 

-12 

Рабочая шкала электрометра 2 x 10 . 

Скорость диаграммной ленты 240 мм/час. 

Объем вводимой пробы 1 - 3 мкл. 

Линейный диапазон определения 0,2 - 10 нг. 

Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте хроматографируемого пика. 

Содержание фуроре в пробе рассчитывают по формуле: 

 

C x V x H x V 

ст ст пр пр 

X = ---------------------, 

H x V x P 

ст a 

 

где: 

X - содержание фуроре в пробе, мг/кг (мг/л); 

C - содержание вещества в стандарте, мкг/мл; 

ст 

V - объем стандарта, введенный в хроматограф, мкл; 

ст 

V - общий объем анализируемой пробы, мл; 

пр 

V - объем анализируемой пробы, введенный в хроматограф, мкл; 

H - высота пика стандарта, мм; 

ст 

H - высота пика анализируемой пробы, мм; 

пр 

P - масса (объем) пробы, взятой для анализа. 

 

3. Требования безопасности 

 

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и токсическими веществами. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru