Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6145-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭФАЛЯ В ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУРАХ 

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 

 

(Дополнение к Методическим указаниям N 6132-91) 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика метода 

 

Эфаль - смесевой препарат: 

(I) трис-O-(этилортофосфит)алюминия (аналог альетта): 

 

\\ C H AlO P . 

(C H O-PO) Al. 6 18 9 3 

2 5 \ 3 

H М.м. 354,0. 

 

(II) фосфит алюминия: 

AlPO . М.м. 106,0. 

(III) фосфористая кислота: 

H PO . М.м. 82,02. 

3 3 

Эфаль - 66,6% к.э. - вязкая прозрачная жидкость, хорошо растворима в воде. Компоненты препарата I, III в воде растворимы, II - труднорастворимы; в органических растворителях практически не растворимы. 

МДУ эфаля в огурцах - 0,5 мг/кг, винограде - 0,8 мг/кг, в воде - 0,3 мг/л. 

 

2. Методика определения эфаля в зерновых культурах 

(пшеница, рожь) методом газожидкостной хроматографии 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Метод основан на извлечении эфаля из исследуемого объекта водой, концентрировании и последующем определении методом реакционной газожидкостной хроматографии в виде метилпроизводных. 

2.1.2. Метрологическая характеристика метода 

Минимально детектируемое количество: 

этилфосфита алюминия - 0,1 нг; 

фосфористой кислоты - 0,1 нг. 

Предел обнаружения в пробе - 0,2 мг/кг. 

Среднее значение определения при n = 5, %, - 73 и 71 соответственно. 

Размах варьирования, %, - 70 - 78 и 64 - 76. 

Стандартное отклонение, %, - 3,6 и 5,7. 

Доверительный интервал среднего при P = 0,95, n = 5 - +/- 6,8% и +/- 10%. 

2.1.3. Избирательность метода 

Условия экстракции и последующего газохроматографического определения эфаля (этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты) позволяют избирательно определять препарат в присутствии фосфорорганических и пестицидов других групп. 

 

2.2. Реактивы и материалы 

 

Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-87. 

Метилгликоль (метилцеллозоль), чда, МРТ 6-09-6347-69. 

Гидразингидрат, чда. 

Кали едкое, ч, ГОСТ 24363-80. 

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74. 

Кислота уксусная (ледяная), хч, ГОСТ 18270-81. 

Кислота серная, хч, ГОСТ 4204-77, 20-процентный раствор. 

Метиловый спирт, хч, ГОСТ 6996-77. 

Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 6262-79. 

Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ 9293-74. 

Водород в баллоне, ГОСТ 3022-88. 

Неподвижная фаза - 15% Карбовакс 20 М на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм). 

Этилфосфит алюминия, хч. 

Фосфористая кислота, хч. 

Основные стандартные растворы (ОСР) этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты с концентрацией по 100 мкг/мл готовят взятием навески каждого вещества 10 мг (0,0100 г) хч и растворением в дистиллированной воде в мерных колбах емкостью 100 мл. Хранить в холодильнике не более 10 дней. 

Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл, 5 мкг/мл, 2 мкг/мл готовят разбавлением ОСР водой. Хранить не более 2 дней. 

 

2.3. Приборы, аппаратура и посуда 

 

Газовый хроматограф серии "Цвет" или аналогичный с пламенно-фотометрическим (фосфорным) детектором (ПФД). 

Колонка стеклянная, длина 2 м, диаметр 3,5 мм. 

Мельница ручная типа РСТ УССР 1913-82 или электрическая, позволяющая измельчать зерно до 1 - 3 мм. 

Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76. 

Колбы грушевидные (круглодонные), ГОСТ 25336-82, вместимостью 500 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14. 

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100 мл. 

Пробирки мерные на шлифах, ГОСТ 1770-74, вместимостью 5 мл. 

Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл. 

Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ SE-2.833.024. 

Прибор для получения диазометана (рис. 1 - не приводится): 

- колба круглодонная, емкостью 500 мл на шлифах (реакционный сосуд); 

- холодильник Либиха на шлифах; 

- делительная воронка на шлифе (капельница); 

- П-образный переходник на шлифах; 

- капилляр. 

 

2.4. Подготовка к определению 

 

2.4.1. Отбор проб 

Отбор проб и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР, N 2051-79 от 21.08.79. 

2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ 

Колонку заполняют стандартной фазой (15% Карбовакс 20 М на хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (20 - 24 мл/мин.) и постепенно поднимая температуру от 100 °C до 150 °C. Затем колонку присоединяют к детектору. 

 

2.5. Описание определения 

 

2.5.1. Экстракция 

Зерно измельчают и просеивают через сита 1 - 3 мм. Для анализа 

берут 25 г средней пробы подготовленного зерна. Приливают к зерну 

50 мл хлороформа и 50 мл воды. Встряхивают пробу на аппарате для 

встряхивания 30 минут. Дают 15 минут отстояться. Сливают жидкую 

фазу, фильтруя под вакуумом на воронке Бюхнера через тройной слой 

марли. К остатку в колбе прибавляют 25 мл хлороформа и 25 мл воды, 

энергично встряхивают и фильтруют, как описано выше. Фильтрат 

переносят в делительную воронку и отбрасывают нижний хлороформный 

слой. Водную фазу переносят в колбу для отгонки и концентрируют до 

10 мл под вакуумом водоструйного насоса при температуре бани не 

более 45 °C. Измеряют точно объем сконцентрированной пробы (V ), 

отбирают 0,2 мл, переносят в мерную пробирку и доводят до 2 мл 

смесью растворителей метилгликоль - ацетонитрил (1:1). Полученную 

смесь переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют при 3000 

об./мин. в течение 15 минут, после чего отбирают для дальнейшего 

метилирования 1 мл центрифугата; либо фильтруют через небольшой 

бумажный фильтр "красная лента" и также отбирают для метилирования 

точно 1 мл смеси, что соответствует аликвоте 0,1 мл (V ) 

сконцентрированного (V ) экстракта. 

2.5.2. Получение метилпроизводных эфаля (этилфосфита алюминия 

и фосфористой кислоты) 

Подготовленные аликвоты экстрактов (V ) метилируют 

диазометаном. Одновременно метилируют стандартные растворы 

этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты. Для этого берут 0,1 мл 

рабочих стандартных растворов (10 мкг/мл, 5 мкг/мл, 2 мкг/мл) и по 

0,9 мл смеси растворителей метилгликоль - ацетонитрил (1:1), т.е. 

подготовленные к метилированию и дальнейшему 

газохроматографическому анализу стандарты содержат 1 мкг/мл, 0,5 

мкг/мл, 0,2 мкг/мл этилфосфита алюминия или фосфористой кислоты. 

2.5.2.1. Получение диазометана 

Вследствие токсичности и раздражающего действия диазометана прибор должен быть установлен в вытяжном шкафу. При работе использовать индивидуальные средства защиты: экран, перчатки, очки. 

В реакционную колбу (см. рис. 1) помещают 6 г кали едкого, 3 мл метанола и 3 мл гидразингидрата. Через смесь продувают азот с расходом ~ 100 мл/мин. Из капельницы подают хлороформ со скоростью 1 капля за 1 - 2 с. 

2.5.2.2. В подготовленные пробы и стандарты вводят по 5 - 6 мкл ледяной уксусной, 3 - 5 мкл 20-процентной серной кислоты и продувают получаемый в описанном выше приборе диазометан до появления интенсивной желтой окраски раствора пробы или стандарта. Затем немедленно нейтрализуют избыток диазометана в пробе (стандарте) прибавлением нескольких микролитров уксусной кислоты до исчезновения окраски. Пробы и стандарты готовы к газохроматографическому определению. 

После окончания метилирования прекращают подачу в реакционную колбу хлороформа, отключают азот, остатки в реакционной колбе заливают водой и тщательно промывают колбу и все части прибора водой. 

2.5.3. Хроматографический анализ 

Газовый хроматограф серии "Цвет" с пламенно-фотометрическим (фосфорным) детектором (ПФД). 

Колонка хроматографическая стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 3,5 мм. 

Неподвижная фаза 15% Карбовакс 20 М на хроматоне N-AW-DMCS. 

Температура колонки 145 °C. 

Температура испарителя 180 °C. 

Газ-носитель - азот с расходом 50 мл/мин. 

Расход водорода - 65 мл/мин. 

Вводимый объем - 1 - 3 мкл. 

-9 

Шкала множителя 2 x 64 x 10 . 

Скорость диаграммной ленты 240 мм/час. 

Время удерживания: 

диметилфосфоната (метилирование фосфористой кислоты): 2,1 мин.; 

метилэтилфосфоната (метилирование этилфосфита алюминия): 2,6 мин. 

Предел определения: 

диметилфосфоната - 0,1 нг; 

метилэтилфосфоната - 0,1 нг. 

Количественную оценку проводят методом соотношения со стандартом по сравнению со стандартами этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты. 

Расчет результатов анализа проводят по формуле: 

 

C x H x V x V 

2 3 1 

X = ----------------, 

H x V x V x P 

1 2 4 

 

где: 

X - содержание этилфосфита алюминия (фосфористой кислоты) в 

анализируемой пробе, мг/кг; 

C - концентрация стандартного раствора для ГЖХ, вводимого в 

хроматограф, мкг/мл; 

H - высота пика стандартного раствора, мм; 

H - высота пика пробы, мм; 

V - конечный объем сконцентрированного экстракта пробы, мл; 

V - часть экстракта V , взятая для метилирования, мл; 

2 1 

V - объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, 

мкл; 

V - объем пробы, введенной в хроматограф; 

P - масса анализируемой пробы, г. 

 

3. Техника безопасности 

 

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР, N 2455-81 от 20.10.81. 

Особое внимание обратить при работе с гидразингидратом и диазометаном. Соблюдать требования безопасности, описанные в методике. Гидразингидрат - токсичная, пожароопасная жидкость (температура воспламенения 59°, самовоспламенения - 267°). При попадании гидразингидрата на окружающие предметы, руки, одежду его немедленно смывают большим количеством воды. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru