Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6135-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРЕПАРАТА "КОМБИ" СМЕСИ КАРБОФУРАНА 

С БЕНОМИЛОМ И ТМТД В РАСТЕНИЯХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ 

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

Препарат "Комби", или Фурадан-300, содержащий 27,2% карбофурана, 5,22% беномила, 5,22% тирама (ТМТД) и 62,36% инертного наполнителя, используется для предпосевной обработки семян с нормой расхода 30 л/т. 

Карбофуран /N-метил-O-2,2-диметилбензо/2,3-дигидрофурил-7/карбамат/. 

 

// \ CH 

¦ ¦¦ ¦/ 3 

\\ / \ / \ 

¦ O CH 

O H 3 М.м. 221,3. 

¦ / 

O=C-N 

CH 

 

Эмпирическая формула C H O N. 

12 15 3 

Синонимы: фурадан, куратер. 

Белое кристаллическое вещество. Т. пл. 150 - 152 °C. Растворимость в воде 700 мг/л, в ацетоне - 150 г/кг, в ацетонитриле - 140 г/кг, в бензоле - 40 г/кг, в диметилсульфоксиде - 270 г/кг, в циклогексане - 90 г/кг. При нагревании со щелочами и кислотами быстро разлагается. Спиртовыми растворами щелочей разрушается даже при комнатной температуре. 

В странах Западной Европы МДУ в шампиньонах - 0,8 мг/кг, в 

кукурузе - 0,1 мг/кг. Токсичен для пчел и других полезных 

насекомых. СК для рыб 0,28 мг/л (при экспозиции 96 ч). 

50 

Акарицид, нематоцид, системный инсектицид. 

Беномил /N-/1-бутилкарбамоилбензимидазолил-2/-O- 

метилкарбамат/. 

 

NCONHC H 

// \ ----- 4 9 

¦ ¦¦ \ --NHCOOCH 

¦ ¦¦ // 3 М.м. 290,3. 

\\ / ----- 

 

Эмпирическая формула C H O N . 

14 18 3 4 

Синонимы: бенлат, бенлейт, узген, фунгицид 1991, фундазол. 

Белое кристаллическое вещество со слабым запахом. Т. пл. 290 °C. Практически нерастворим в воде и в большинстве органических растворителей. Нелетуч. 

ПДК в воздухе рабочей зоны 0,01 мг/куб. м, в воде 0,5 мг/л. В СССР МДУ в сахарной свекле - 0,1 мг/кг, пшенице - 0,5 мг/кг, фруктах, огурцах, томатах и капусте - 0,5 мг/кг. 

Для теплокровных животных и человека малотоксичен. Слаботоксичен для пчел, птиц и рыб. 

Основной продукт разложения беномила - N-метил-/бензимидазолил-2/-карбамат (БМК). 

БМК также обладает фунгицидным действием. 

 

// \ N 

¦ ¦¦ ¦ 

¦ ¦¦ ¦ NHCOOCH М.м. 191,2. 

\\ / \ / 3 

NH 

 

Эмпирическая формула C H O N . 

9 9 2 3 

Кристаллическое вещество от серого или голубого до темно-коричневого цвета. Т. пл. 307 - 312 °C. Плохо растворим в воде и многих органических растворителях, растворим в кислотах. 

ПДК в воде 0,1 мг/л. 

Беномил и БМК - системные фунгициды. 

Тирам (ТМТД) /тетраметилтиурамдисульфид/. 

 

[(CH ) NCS] М.м. 240,4. 

3 2\\ 2 

 

Эмпирическая формула C H N S . 

6 12 2 4 

Кристаллическое вещество белого или кремового цвета. Хорошо растворим в хлороформе, ацетоне, хуже в этаноле, диэтиловом эфире, практически нерастворим в воде. 

Протравитель семян, используемый для защиты растений от заболеваний, инфекционное начало которых распространяется семенами или находится в почве. 

ПДК в воздухе рабочей зоны 0,01 мг/куб. м. В СССР остаточные количества в продуктах питания не допускаются. 

 

2. Методика определения смеси 

 

2.1. Основные положения 

 

Метод основан на извлечении смеси пестицидов из исследуемой пробы подкисленной водой с pH 3, очистке перераспределением пестицидов в хлороформ с последующим определением в тонком слое сорбента. 

 

2.1.2. Метрологическая характеристика метода 

 

Таблица 1 

 

ДИАПАЗОН ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ 

 

TTT 

¦ Пестицид ¦ Проявитель ¦ Диапазон определяемых ¦ Цвет пятен ¦ 

¦ ¦ ¦ концентраций, мкг ¦ ¦ 

+++++ 

¦Карбофуран ¦N 1 ¦ ¦ ¦ 

¦ ¦А, Б ¦0,1 - 3 ¦бордовые ¦ 

¦ ¦А, В ¦0,1 - 3 ¦желтые ¦ 

¦ ¦А, Г ¦0,1 - 3 ¦синие ¦ 

¦ТМТД ¦N 1 ¦ ¦ ¦ 

¦ ¦А, Б ¦0,5 - 3 ¦бурые ¦ 

¦ ¦Г ¦0,5 - 3 ¦оранжевые ¦ 

¦ ¦N 2 ¦0,05 - 10 ¦голубые ¦ 

¦Беномил, БМК ¦N 2 ¦0,5 - 10 ¦голубые ¦ 

¦ТМТД ¦N 3 ¦0,05 - 5 ¦светло-зеленые ¦ 

¦Карбофуран ¦N 4 ¦0,1 - 5 ¦сине-фиолетовые ¦ 

¦ТМТД ¦N 4 ¦0,5 - 10 ¦белые ¦ 

¦Беномил, БМК ¦N 4 ¦1,0 - 10 ¦сине-фиолетовые ¦ 

¦Карбофуран ¦УФ-свет ¦0,05 - 10 ¦сиреневые ¦ 

¦ТМТД ¦УФ-свет ¦0,05 - 10 ¦сиреневые ¦ 

¦Беномил, БМК ¦УФ-свет ¦0,5 - 10 ¦сиреневые ¦ 

L+++ 

 

Таблица 2 

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА, N = 5, P = 0,95 

 

TTTTT 

¦Анализи-¦ Пестицид ¦ Предел ¦ Среднее ¦ Стандартное ¦ Доверительный ¦ 

¦руемая ¦ ¦обнаружения,¦ значение ¦отклонение, %¦интервал, +/- %¦ 

¦проба ¦ ¦ мг/кг ¦определения,¦ ¦ ¦ 

¦ ¦ ¦ ¦ % ¦ ¦ ¦ 

+++++++ 

¦Семена ¦Карбофуран¦0,50 ¦95,0 ¦1,8 ¦2,4 ¦ 

¦ ¦Беномил ¦1,00 ¦83,5 ¦4,7 ¦7,1 ¦ 

¦ ¦БМК ¦1,00 ¦82,4 ¦4,9 ¦7,5 ¦ 

¦ ¦ТМТД ¦0,25 ¦92,0 ¦3,7 ¦3,2 ¦ 

¦Зеленая ¦Карбофуран¦0,01 ¦81,8 ¦4,9 ¦7,6 ¦ 

¦масса ¦Беномил ¦0,10 ¦79,0 ¦7,6 ¦15,9 ¦ 

¦ ¦БМК ¦0,10 ¦79,9 ¦6,5 ¦10,2 ¦ 

¦ ¦ТМТД ¦0,01 ¦80,8 ¦5,2 ¦8,1 ¦ 

¦Корне- ¦Карбофуран¦0,01 ¦91,8 ¦3,7 ¦5,1 ¦ 

¦плоды ¦Беномил ¦0,10 ¦79,5 ¦6,1 ¦9,7 ¦ 

¦ ¦БМК ¦0,10 ¦82,5 ¦5,2 ¦8,0 ¦ 

¦ ¦ТМТД ¦0,01 ¦91,5 ¦6,5 ¦9,0 ¦ 

L+++++ 

 

2.1.3. Избирательность метода 

Метод специфичен. 

 

2.2. Реактивы и растворы 

 

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79. 

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78. 

Этиловый спирт ректификат 96-процентный, ГОСТ 5962-81. 

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74. 

Кислота хлористоводородная, ГОСТ 3118-77. 

Кислота уксусная, ГОСТ 22300-76. 

Кислота лимонная, осч, ГОСТ 908-79. 

Вода дистиллированная. 

Натрий сернокислый, безводный, чда, ГОСТ 4266-76. 

Кали едкое, хч, ГОСТ 24363-80. 

Перманганат калия, чда, ГОСТ 20490-75. 

п-Нитроанилин, чда, ТУ 6-09-258-70. 

Натрий нитрит, хч, ГОСТ 4197-74. 

Хлорная медь, ч, ГОСТ 4967 -48. 

Азотнокислое серебро, чда, ГОСТ 1277-81. 

Бромфеноловый синий, чда, ТУ 6-09-4530-77. 

о-Толидин, хч, ТУ 6-09-2232-75. 

Соли диазонил: прочный синий Б, ГОСТ 11632-65; прочный красный Б, ГОСТ 11827-79; прочный голубой Б, ГОСТ 11632-80. 

Пластинки "Силуфол" УФ-254. 

Бумага фильтровальная. 

Карбофуран - 99,5% д.в. 

Беномил - 99% д.в. 

БМК - 50% д.в. 

ТМТД - 80% д.в. 

"Комби" - к.э. 

Приготовление стандартных растворов 

Для сравнения готовят основные растворы: 0,3-процентный препарат "Комби", стандартные растворы карбофурана, беномила, БМК и ТМТД, содержащие 1000 мкг/мл, в ацетоне. 

Рабочие стандартные растворы, содержащие 500 мкг/мл и 50 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением ацетоном основных растворов. 

Хранят растворы в холодильнике в склянках с притертыми пробками: карбофуран - 6 месяцев, БМК - 30 дней, ТМТД - 10 дней, беномил - 10 дней, 0,3-процентный раствор препарата "Комби" - 10 дней. 

Проявляющие реактивы 

N 1 

Реагент А. 15-процентный KOH в спиртово-водном растворе (15 г KOH растворяют в 60 мл этилового спирта и 40 мл воды). 

Реагент Б. Смешивают перед употреблением 0,1-процентный раствор п-нитроанилина в 0,1 н растворе хлористоводородной кислоты и 4-процентный водный раствор нитрита натрия в соотношении 10:1. 

Реагент В. 0,0,1-процентный раствор солей диазония в ацетоне. 

Реагент Г. 0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в гексане с последующим нагреванием 3 - 5 мин. при 110 - 140 °C. 

Пластинку опрыскивают реагентом А, подсушивают на воздухе и опрыскивают реагентом Б, или В, или Г. 

N 2. Бромфеноловый реагент 

Опрыскивают пластинку смесью (1:1) 0,05-процентного раствора 

бромфенолового синего в 50-процентном этиловом спирте с 

1-процентным раствором AgNO в ацетоне. Через 1 - 2 минуты 

опрыскивают 1-процентным раствором лимонной кислоты или 

10-процентным раствором уксусной кислоты. 

N 3. 1-процентный раствор CuCl в этиловом спирте. 

N 4. Галогенирование, о-толидин, йодид калия 

Пластинку обрабатывают парами хлора, проветривают и опрыскивают проявляющим реагентом. 

Раствор для хлорирования. Смешивают равные объемы 3-процентного раствора перманганата калия и хлористоводородной кислоты. 

Проявляющий реагент. 0,2 г о-толидина растворяют в 2 мл уксусной кислоты, 0,8 г йодида калия растворяют в 2 мл дистиллированной воды, смешивают растворы и доводят водой до 200 мл. 

 

2.3. Приборы и посуда 

 

Весы технические. 

Весы аналитические 2 класса, ГОСТ 19491-74. 

Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74. 

Водяная баня, ТУ 46-22-603-75. 

Микропипетки, ГОСТ 20292-74. 

Электроплитка, ТУ 92-275-76. 

Аппарат для встряхивания, ТУ 6921-1084-78. 

Круглодонные колбы, ГОСТ 25336-82, вместимостью 250 мл. 

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол" (ЧССР). 

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок, ГОСТ 25336-82. 

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82. 

Эксикатор, ГОСТ 25336-82. 

Колбы плоскодонные со шлифом, ГОСТ 25336-82, вместимостью 500 мл. 

Воронка делительная, ГОСТ 25336-82, на 500 мл. 

Вакуумный насос, ГОСТ 10696-75. 

Хроматоскоп. 

 

2.4. Подготовка к определению 

 

2.4.1. Отбор проб 

Пробы для анализа отбираются в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР за N 2051-79 21.08.1979. 

 

2.5. Проведение определения 

 

2.5.1. Экстракция 

Растения сахарной свеклы и корнеплоды. 20 - 50 г образца измельчают, помещают в коническую колбу и заливают 100 - 150 мг подкисленной воды с pH 3. Экстракцию проводят на аппарате для встряхивания в течение часа. Экстракт переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию трижды хлороформом (100, 50, 50 мл) по 5 мин. Полученный экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу, отгоняют хлороформ на водяной бане или ротационном испарителе до 0,5 - 1 мл. Остаток переносят в мерную пробирку, доводят до объема 1 - 1,5 мл хлороформом, делят на две равные части и наносят на пластинку с левой и правой стороны на расстоянии 1,5 см от краев. Рядом наносят стандартные растворы "Комби" или смесей препаратов. 

Семена. 0,4 г семян (20 штук) помещают в коническую колбу на 50 мл, заливают 20 мл хлороформа. Встряхивают в течение часа. Фильтруют через безводный сернокислый натрий, отгоняют хлороформ на ротационном испарителе до 0,5 - 1 мл. Переносят в пробирку, доводят объем до 2 мл, делят на две равные части и проводят анализ, как при определении в растениях. 

Семена, обработанные "Комби". Для проверки качества обработки семян берут 0,2 г семян (10 штук), заливают 10 мл хлороформа. Экстрагируют в течение часа. Сливают хлороформ в мерную пробирку, измеряют объем, доводят до 10 мл. Аликвотную часть 0,05 - 0,1 мл наносят в две точки в правой и левой части пластинки. Дальше проводят определение, как в растениях. 

2.5.2. Хроматографирование 

Пластинку помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой из смеси гексан - ацетон (3:2) или хлороформа. Когда растворитель поднимется на 10 см, пластинку вынимают и сушат на воздухе. 

2.5.3. Проявление пластинок 

Пластинку просматривают под УФ-светом. Светящиеся пятна карбофурана, ТМТД, беномила и БМК обводят простым карандашом. Для дополнительной идентификации соединений можно использовать проявитель N 4 (см. табл. 1). При использовании других проявителей поступают следующим образом. Правую часть пластинки закрывают фильтровальной бумагой. Левую проявляют, используя проявитель N 1. Затем фильтровальной бумагой закрывают левую, а правую обрабатывают проявителем N 2. Для обнаружения ТМТД можно использовать специфичный проявитель N 3. 

Величина R в подвижной фазе гексан - ацетон (3:2); 

карбофурана - 0,45; беномила - 0,65; БМК - 0,25; ТМТД - 0,50; в 

хлороформе: карбофурана - 0,25; беномила - 0,45; БМК - 0,15; 

ТМТД - 0,55. 

 

2.6. Обработка результатов анализа 

 

Количество препаратов на пластинке определяют по площади пятен, сравнивая с пятнами стандартных растворов, по формуле: 

 

P x S 

1 x 

P = ------- мкг, 

x S 

 

где: 

P и P - содержание препарата в исследуемом и стандартном 

x 1 

растворе в мкг; 

S и S - площади соответствующих пятен, кв. мм. 

x 1 

Количество препаратов в мг/кг рассчитывают по формуле: 

 

1000 x P x V 

X = ------------, 

A x V 

 

где: 

A - масса анализируемой пробы, г; 

V - объем пробы, мл; 

V - объем аликвоты, мкг; 

P - количество препарата в хроматографируемой пробе, мкг. 

 

2.7. Требования безопасности 

 

Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru