Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6131-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БАЙФИДАНА В ЗЕРНОВЫХ 

И ЛЕКАРСТВЕННЫХ КУЛЬТУРАХ, В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДАМИ 

ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

Байфидан (триадименол) - 1-4-(хлорфенокси)-3,3-диметил-1-(1-H-1,2,4-триазол-1-ил)бутанол-2. 

 

OH 

_____ ¦ 

Cl_// \\_O__CH__CH__C(CH ) C H ClN O . 

\ ___ / ¦ 3 3 14 18 3 2 

--- N 

/\ М.м. 295,8. 

/ \N 

¦¦__¦¦ 

 

Химически чистый байфидан - бесцветный кристаллический 

порошок, устойчив в кислых, нейтральных и щелочных средах. 

ЛД для крыс 700 - 1200 мг/кг. 

50 

Байфидан - высокоэффективный фунгицид с системными свойствами из группы действующих веществ, относящихся к азоловым соединениям. Продукт отличается очень хорошим действием против настоящих мучнисто-росяных грибов и против различных ржавчинных болезней. Наряду с хорошим защитным действием байфидан обладает также лечебным и искореняющим действием. Байфидан применяется при воздействии зерновых культур, в овощеводстве, виноградарстве, при выращивании огурцов и дынь, а также в декоративном цветоводстве. Норма расхода - 125 г д.в. на га, то есть 0,5 л препарата на га. 

Байфидан выпускается в виде эмульгирующего концентрата с 250 г триадеменола на 1 л (250 к.э.). 

 

2. Методика определения байфидана 

 

2.1. Основные положения 

 

Метод основан на извлечении байфидана из анализируемой пробы органическим растворителем, очистке экстракта на колонке окиси алюминия с последующим определением методами газожидкостной хроматографии с термоионным (ТИД) детектором и тонкослойной хроматографии на пластинках "Силуфол". 

2.1.2. Метрологическая характеристика метода (см. табл. 1) 

 

Таблица 1 

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАЙФИДАНА 

 

TTTTTTT 

¦Препарат¦ Объект ¦Мини- ¦Нижний ¦Размах ¦Среднее ¦Стан- ¦Доверительный¦ 

¦ ¦ ¦мальное¦предел ¦варьирова- ¦значение¦дартное ¦ интервал ¦ 

¦ ¦ ¦детек- ¦опреде-¦ния, % ¦опреде- ¦отклоне-¦ среднего ¦ 

¦ ¦ ¦тируе- ¦ления, ¦ ¦ления, ¦ние, ¦ при n = 5, ¦ 

¦ ¦ ¦мое ¦мг/л, ¦ ¦% ¦% ¦ P = 0,95 ¦ 

¦ ¦ ¦количе-¦мг/кг ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

¦ ¦ ¦ство, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

¦ ¦ ¦мкг ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

+++++++++ 

¦Байфидан¦зерно ¦ ¦0,020 ¦70,0 - 90,0¦83,3 ¦+/- 2,67¦83,5 +/- 5,6 ¦ 

¦ ¦почва ¦0,004 ¦0,012 ¦72,0 - 95,0¦90,8 ¦+/- 2,84¦90,8 +/- 6,8 ¦ 

¦ ¦вода ¦ ¦0,007 ¦95,0 - 100 ¦98,3 ¦+/- 3,99¦98,3 +/- 7,7 ¦ 

¦ТСХ ¦лекарст-¦1,0 ¦0,1 ¦70 - 88 ¦78,9 ¦+/- 4,77¦+/- 5,99 ¦ 

¦ ¦венные ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

¦ ¦культуры¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ 

L+++++++ 

 

2.1.3. Избирательность метода 

Другие препараты по сфере применения в данных условиях хроматографирования определению не мешают. 

 

2.2. Реактивы и растворы 

 

Ацетон, чда, ГОСТ 2603-79. 

Этилацетат, хч, ГОСТ 22300-76. 

Хлористый кальций, ГОСТ 4161-77. 

Хлороформ медицинский, фармакопея, ГОСТ 20015-74. 

Спирт этиловый, ГОСТ 5962-67. 

Окись алюминия II ст. активности, ГОСТ 8136-85. 

Натрий сернокислый, безводный, хч, ГОСТ 4166-77. 

Лимонная кислота, чда, ГОСТ 908-79. 

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74. 

Водород из баллона, ГОСТ 3022-80, или получаемый из генератора водорода. 

Воздух из баллона, ГОСТ 9-01-80, или нагнетаемый компрессором. 

3% OV-17 на газохроме (0,16 - 0,20 мм). 

5% E-301 на хроматоне N-AW-DMCS. 

Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-4530-77. 

Азотнокислое серебро, ГОСТ 1277-75. 

Стандартный раствор байфидана в спирте или ацетоне 1 мг/мл (I), из него готовится серия растворов с концентрацией 25 мкг/мл (II), 10 мкг/мг (III). 

Проявляющие реактивы: 

1. 0,4% ацетоновый раствор бромфенолового синего с 2% водным раствором азотнокислого серебра в равных объемах. 

2. 2% водный раствор лимонной кислоты. 

 

2.3. Приборы, аппаратура и посуда 

 

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76. 

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл. 

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 300 мл. 

Круглодонные колбы, ГОСТ 25336-82, на 250 мл. 

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 или 0,2 мл. 

Воронки конические, ГОСТ 25336-82. 

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емк. 50 мл. 

Микропипетки, ГОСТ 20292-74. 

Микрошприц МШ N 10, ТУ 2-833-024. 

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82. 

Хроматограф "Цвет-106", "Цвет-500" или аналогичный с ТИД. 

 

2.4. Отбор проб 

 

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб" N 2051-79 от 21.08.79. 

 

2.5. Проведение определения 

 

2.5.1. Экстракция 

Вода. 200 мл воды в делительной воронке экстрагируют дважды по 100 - 200 мл этилацетата в течение 3 - 5 минут. Осушенный и объединенный экстракт концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, аликвоту вводят в хроматограф. 

Почва, зерно. 100 г почвы или 10 - 20 г измельченного зерна экстрагируют 100 - 200 мл этилацетата на встряхивателе в течение 1 часа. Затем экстракцию повторяют, встряхивая анализируемую пробу в течение 30 минут со 100 мл этилацетата. Осушенный и объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе до объема 2 - 3 мл и проводят очистку. 

Лекарственное сырье. Измельченную навеску лекарственного сырья (30 г сырого и 5 г сухого) заливают ацетоном (100 и 30 мл). Остаток промывают на фильтре дважды ацетоном. Ацетон отгоняют до 5 - 10 мл. 

2.5.2. Очистка экстракта 

Почва, зерно. Сконцентрированный экстракт переносят в бюкс, заполненный 5 - 10 г окиси алюминия. Колбу дважды смывают этилацетатом по 1 мл и также переносят в бюкс. Затем ставят бюкс на песочную баню (60 °C) и выдерживают до полного улетучивания этилацетата. Стеклянной палочкой тщательно перемешивают сорбент в бюксе и переносят в делительную воронку, в узкий конец которой помещают тампон из гигроскопической ваты. Для элюирования байфидана через колонку пропускают 400 мл воды. Скорость вытекания 120 кап./мин. Водный раствор экстрагируют хлороформом (3 раза по 50 мл), встряхивая каждый раз в течение 2 мин. Объединенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр и безводный сернокислый натрий в грушевидную колбу и выпаривают на ротационном испарителе до 0,2 мл, а затем остаток высушивают током воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона. 

Лекарственное сырье. К ацетоновому экстракту добавляют 5 мл 

0,05 н и CaCl и ставят в морозильную камеру на 1 час. Затем 

экстракт фильтруют через фильтр "синяя лента", добавляют 25 мл 

воды и экстрагируют байфидан этилацетатом (3 раза по 25 мл). 

Объединенный этилацетатный экстракт упаривают на ротационном 

испарителе до объема 5 мл. Далее поступают, как при очистке почвы 

и зерна. Остаток растворяют в 0,5 мл ацетона или спирта. 

2.5.3. Условия газожидкостной хроматографии 

Определение проводят на хроматографе "Цвет" с термоионным 

детектором. Используют стеклянную колонку длиной 1 м, диаметром 3 

мм, носитель - газохром (0,16 - 0,20 мм с 3% OV-17), температура 

колонки - 230 °C, испарителя - 290 °C. Время удерживания - 1 мин. 

30 сек. Линейность детектирования сохраняется в пределах 1 - 6 нг. 

-10 

Рабочая шкала 2 x 10 . Для колонки с 5% E-301 температура 

испарителя 230 °C, температура колонки 210 °C, рабочая шкала ИМТ - 

-10 

2 x 10 . Время удерживания - 1 мин. 15 сек. Для обеих колонок 

расход азота 75 мл/мин., воздуха - 150 мл/мин., водорода - 27 

мл/мин. Скорость движения ленты самописца - 600 мм/час. 

2.5.4. Условия хроматографирования в тонком слое 

Определение байфидана проводят методом тонкослойной хроматографии на пластинках "Силуфол". С помощью микропипетки наносят на пластинку 0,1 мл экстракта. На расстоянии 2 - 3 см наносят 3 - 4 пятна стандартного раствора байфидана (1 мкг, 3 мкг, 5 мкг, 10 мкг). Пластинку хроматографируют в системе гексан:ацетон (3:2). 

После того как фронт растворителя поднимается на 10 см, 

пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе и опрыскивают 

последовательно проявляющими реактивами 1 и 2. При наличии в пробе 

байфидана появляется синее пятно. R препарата - 0,72. 

 

2.6. Обработка результатов анализа 

 

Газожидкостное определение 

Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте пика. 

Для количественного определения измеряют высоту пиков проб и стандартных растворов. Содержание в пробе рассчитывают по формуле: 

 

M x H x V 

ст пр k 

X = --------------, 

H x V x M 

ст x 

 

где: 

X - содержание в пробе, мг/кг или мг/л; 

M - содержание в стандартном растворе, нг; 

ст 

H - высота пика стандартного раствора, мм; 

ст 

H - высота пика пробы, мм; 

пр 

V - объем конечного экстракта, мл; 

V - объем экстракта пробы, введенного в испаритель, мкл; 

M - навеска или объем пробы в г или мл. 

Тонкослойная хроматография 

Количественное определение содержания байфидана в пробах проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартных растворов. 

Содержание препарата в пробе рассчитывается по формуле: 

 

A x V 

X = ------, 

V x P 

 

где: 

X - содержание байфидана в пробе, мг/кг; 

A - количество препарата, найденное путем визуального 

сравнения со стандартным раствором, в мкг; 

V - объем пробы перед нанесением на пластинку в мл; 

V - объем раствора, нанесенного на пластинку, в мл; 

P - навеска в г. 

 

3. Требования техники безопасности 

 

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru