Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6127-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2,4-Д В ВОДЕ МЕТОДОМ ОБРАЩЕННО-ФАЗОВОЙ 

ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

Краткая характеристика препарата приведена в Методических указаниях. 

 

2. Методика определения 2,4-Д в воде 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Метод основан на концентрировании 2,4-Д в пробе и последующем определении препарата с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ. 

2.1.2. Метрологическая характеристика метода 

Среднее значение определения (%) - 90 

Стандартное отклонение (%) - 8,06 

Относительное стандартное отклонение (%) - 3,61 

Доверительный интервал (+/- %) - 2,95 

Предел обнаружения (мг/л) в неочищенной и очищенной пробе - 0,7 и 0,002. 

2.1.3. Избирательность метода 

Метод избирателен в присутствии глобальных загрязнителей окружающей среды - производных циклопарафинов (у-ГХЦГ и его изомеры), соединений дифенилметанового ряда (ДДТ и его производные), а также галакона, глифосата и других гербицидов, применяемых на зерновых культурах. 

 

2.2. Реактивы и растворы 

 

Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72. 

н-Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78. 

Метанол, хч, ГОСТ 6995-77. 

Натрия сульфат, безводный, ч, ГОСТ 4166-76. 

Натрия гидрокарбонат, чда, ГОСТ 4201-66. 

Универсальные индикаторные бумаги pH 0 - 12 "Lachema" (ЧCCP). 

Фильтры "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77. 

Хлороформ, Фармакопея СССР, ГОСТ 20015-74. 

Хлористоводородная кислота, ч, ГОСТ 3118-77. 

Эфир для наркоза, Фармакопея СССР, ГОСТ 6265-74. 

Стандартный раствор 2,4-Д в воде с концентрацией 10 мкг/мл. 

 

2.3. Приборы и посуда 

 

Весы аналитические типа ВЛР-200, ГОСТ 24104-80. 

Весы технические типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80. 

Испаритель ротационный типа ИР-1М2, ТУ 25-1173-102-84. 

Микроколонка стандартная металлическая (50 x 2 мм) с сорбентом 

"Силасорб C ", 5 мкм, "Chemapol" (ЧССР). 

18 

Хроматограф микроколоночный жидкостный типа "Милихром". 

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, на 250 мл. 

Воронки конические, ГОСТ 25336-82. 

Колбы конические с пришлифованной пробкой, ГОСТ 25336-82, на 100 мл. 

Колбы круглодонные со шлифом, ГОСТ 25336-82, на 100 мл. 

Колбы плоскодонные, ГОСТ 25336-82, на 250 мл. 

Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74, на 1 мл. 

Пробирки мерные, ГОСТ 1770-74, на 10 мл. 

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 и 25 мл. 

Линейка металлическая, ГОСТ 25706-83. 

 

2.4. Отбор, хранение и подготовка проб 

 

Отбор, хранение и подготовка проб к анализу проводятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за N 2051-79. 

 

2.5. Подготовка к определению 

 

2.5.1. Приготовление элюента 

Элюирующая смесь вода - метанол в объемном соотношении 7:3 готовится заранее, перед проведением хроматографического анализа. Цилиндром вместимостью 100 мл отмеряют 70 мл дистиллированной воды, которую выливают в плоскодонную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 100 мл; туда же приливают 30 мл метанола, колбу закрывают пробкой, содержимое перемешивают при легком взбалтывании и дают смеси отстояться в течение 30 - 40 мин., после чего фильтруют в сосуд для элюента. Элюент отстаивают еще некоторое время (до прекращения образования пузырьков воздуха на стенках сосуда) и приступают к подготовке хроматографической системы прибора к анализу. 

2.5.2. Подготовка хроматографической системы к проведению определения 2,4-Д. Подготовку прибора к хроматографическому анализу начинают с промывки насоса свежеприготовленным элюентом, после чего насос заполняют элюирующей смесью вода - метанол (7:3) и приступают к промывке хроматографической системы и заполнению кюветы сравнения элюентом. Подготовка хроматографа продолжается до установления равномерного нулевого выходного сигнала детектора и снижения шумов до минимума. 

 

2.6. Проведение анализа 

 

2.6.1. Экстракция препарата из анализируемой пробы 

Чистую пробу воды (прозрачная и бесцветная) фильтруют через складчатый фильтр и проводят хроматографический анализ неочищенной пробы, вводя в колонку от 5 до 40 мкл (вводимый объем берется по усмотрению оператора, но не более 40 мкл). 

Если проба воды грязная (мутная и окрашена или содержит сопутствующие примеси природных органических соединений, других пестицидов, влияющих на проведение анализа), поступают следующим образом: 100 мл отфильтрованной пробы помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 250 мл, туда же добавляют 4 г гидрокарбоната натрия, взвешенного на технических весах, и, при перемешивании раствора, его растворяют в пробе, после чего содержимое колбы переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл. Для удаления из пробы влияющих на анализ примесей проводится их переэкстракция сначала в хлороформ (2 раза по 25 мл), а затем в н-гексан (2 раза по 25 мл) при взбалтывании содержимого воронки в течение 1 мин. Растворители, содержащие сопутствующие примеси пробы, отбрасывают, а водный раствор сливают в колбу вместимостью 250 мл и постепенно приливают туда 1 мл хлористоводородной кислоты, раствор перемешивают при легком взбалтывании. После прекращения выделения углекислого газа раствор переносят в делительную воронку и проводят переэкстракцию 2,4-Д в диэтиловый эфир (2 раза по 20 мл) в течение 1 мин. Водный раствор отбрасывают, а объединенный эфирный экстракт отмывают дистиллированной водой (до нейтрального pH), фильтруют через прокаленный сульфат натрия в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл, упаривают на ротационном испарителе при 30 - 35 °C до небольшого объема, переносят в мерную пробирку и упаривают в токе азота особой чистоты досуха. Сухой остаток пробы растворяют в 0,2 мл дистиллированной воды и проводят хроматографический анализ. 

2.6.2. Хроматографическое определение 2,4-Д методом ВЭЖХ 

Количественное определение 2,4-Д проводят при следующих 

условиях хроматографирования: неподвижная фаза - "Силасорб C ", 5 

18 

мкм; подвижная фаза - вода с метанолом в объемном соотношении 7:3; 

скорость элюирующего потока - 200 мкл/мин.; поддиапазон 

чувствительности измерений - 0,2 А; время измерения выходного 

сигнала - 0,6 с; скорость протяжки диаграммной ленты - 300 мм/час; 

длина волны поглощения светового потока - 280 нм; объем 

удерживания - 235 мкл. 

После окончания подготовки прибора к анализу проводится хроматографирование градуировочного раствора 2,4-Д (10 мкг/мл) в объеме от 5 до 40 мкл (5, 10, 15, 20, 30, 40 мкл), а затем пробы воды в объеме, необходимом для обнаружения препарата (но не более 40 мкл), как в несконцентрированной, так и в сконцентрированной (при необходимости) пробе. Если содержание в пробе находится за пределом верхней границы обнаружения, часть ее разбавляют в определенном объеме дистиллированной воды и анализ повторяют при тех же условиях хроматографирования. 

2.6.3. Обработка результатов анализа 

Количественное определение 2,4-Д проводят методом соотношения со стандартами, путем сравнения площадей пиков в анализируемом образце воды и стандартном растворе. 

Расчет проводят по формуле: 

 

S x V x C 

X = ---------- (мг/л), 

S x P 

 

где: 

S - площадь пика 2,4-Д в пробе, кв. мм; 

S - площадь пика стандартного раствора, кв. мм; 

C - концентрация стандартного раствора, мкг/мл; 

V - объем анализируемой пробы, мл; 

P - конечный объем исходной пробы, мл. 

 

3. Требования безопасности 

 

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, концентрированными кислотами. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru