Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6115-91 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КАРТОЛИНА-2 В БИОСУБСТРАТАХ 

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 

 

(Дополнение к N 4355 от 08.06.87) 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика вещества 

 

Краткая характеристика представлена во Временных методических указаниях. 

 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Метод основан на извлечении препарата из биосубстрата растворителем, очистке экстрактов и хроматографировании в тонком слое пластинок "Силуфол" с подвижной фазой гексан - ацетон в соотношении 15:12. Места локализации препарата обнаруживают обработкой пластинок водно-аммиачным раствором азотнокислого серебра или реактивом Эрлиха. 

2.1.2. Метрологическая характеристика метода 

Метрологическая характеристика метода определения картолина-2 в биосубстратах представлена в таблице 1. 

 

Таблица 1 

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ 

КАРТОЛИНА-2 В БИОСУБСТРАТАХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ 

(ПРИ P = 0,95, N = 20) 

 

¦Анализируемый¦ Метрологические параметры ¦ 

¦ объект +TTT+ 

¦ ¦диапазон опр.¦среднее значе-¦стандартное ¦ доверительный ¦ 

¦ ¦концентраций,¦ние процента ¦отклонение, ¦интервал среднего¦ 

¦ ¦ мкг/г (мл) ¦обнаружения, %¦ +/- % ¦ значения, % ¦ 

++++++ 

¦Кровь ¦0,2 - 2,0 ¦77,4 ¦+/- 7,2 ¦15,5 ¦ 

¦Легкие ¦0,2 - 2,0 ¦74,1 ¦+/- 4,3 ¦9,2 ¦ 

¦Селезенка ¦0,2 - 2,0 ¦76,4 ¦+/- 5,9 ¦12,6 ¦ 

¦Сердце ¦0,2 - 2,0 ¦81,55 ¦+/- 4,2 ¦9,1 ¦ 

¦Почки ¦0,2 - 2,0 ¦76,25 ¦+/- 4,8 ¦10,2 ¦ 

¦Печень ¦0,2 - 2,0 ¦70,90 ¦+/- 3,2 ¦6,8 ¦ 

¦Мозг ¦0,2 - 2,0 ¦73,75 ¦+/- 4,4 ¦9,4 ¦ 

¦Моча ¦0,2 - 2,0 ¦65,20 ¦+/- 4,9 ¦10,4 ¦ 

¦Кал ¦0,2 - 2,0 ¦71,71 ¦+/- 3,8 ¦8,2 ¦ 

L++++ 

 

2.1.3. Избирательность метода 

Определению не мешают хлорорганические и фосфорорганические пестициды, гербициды группы хлорзамещенных феноксиалканкарбоновых кислот и карбаматов. 

 

2.2. Реактивы и материалы 

 

Картолин-2, хч (содержание основного вещества не ниже 96%). 

Ацетон, чда, ГОСТ 2603-79. 

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78. 

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74. 

Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-74. 

Кислота хлористоводородная, хч, ГОСТ 3118-77. 

Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76. 

Этанол, хч, ГОСТ 5962-81. 

Бутанол, чда, ГОСТ 6006-78. 

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77. 

Азотнокислое серебро, хч, ГОСТ 1277-81. 

Аммиак концентрированный, хч, ГОСТ 3760-79. 

Стандартные растворы картолина-2 в ацетоне с содержанием препарата 100 и 1 мкг/мл. Растворы хранить в холодильнике не более трех месяцев. 

п-Диметиламинобензальдегид, ч, ТУ 6-09-3272-77. 

Водно-аммиачный раствор азотнокислого серебра. 0,85 г азотнокислого серебра помещают в мерную колбу на 100 мл и растворяют в нескольких мл дистиллированной воды, прибавляют 2,5 мл концентрированного аммиака. Содержимое колбы перемешивают и доводят уровень раствора до метки дистиллированной водой. Хранить проявляющий раствор в темной склянке не более двух недель. 

Реактив Эрлиха (модифицированный). 1 г п-диметиламинобензальдегида растворяют в смеси 30 мл этанола, 3 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 180 мл бутанола-1. Проявляющий раствор хранить в холодильнике три недели. 

 

2.3. Приборы, посуда и аппаратура 

 

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76. 

Колбы для отгонки растворителя, ГОСТ 25336-82. 

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82. 

Пластинки "Силуфол" UV-254 (ЧССР), 15 x 15 см. 

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 100 мл. 

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, на 250 мл. 

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 50, 100 и 250 мл. 

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1, 5 и 10 мл. 

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл. 

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82. 

Воронки химические, ГОСТ 25336-82. 

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-4, ТУ 16-336-280-74. 

Сушильный шкаф ШС-40М, МРТУ 42-1359-67. 

 

2.4. Отбор проб 

 

Пробы отбирают в лабораторных условиях и сразу же помещают в испарительную камеру холодильника (-5 - 8 °C). Образцы хранят на льду не более пяти суток. 

 

2.5. Описание определения 

 

2.5.1. Экстракция и очистка 

Легкие, сердце, печень, селезенка, почки, мозг, кровь и кал. 5 г кала или биосубстрата, тщательно измельченного ножницами, или 5 мл крови помещают в коническую колбу на 100 мл, заливают 50 мл хлороформа и оставляют на 2 - 3 часа, периодически перемешивая. Хлороформ осторожно сливают через фильтр "синяя лента" со слоем безводного сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя. Экстракцию повторяют еще 2 x 3 мл хлороформа и сливают туда же. Растворитель выпаривают досуха на ротационном испарителе при 60 - 70 °C и сухой остаток ацетонитрилом количественно переносят на пластинку для тонкослойного хроматографирования. 

Моча. 5 мл мочи помещают в коническую колбу на 250 мл, разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:9 и подщелачивают 5% раствором едкого натра до pH 8. Сюда же добавляют 50 мл хлороформа и оставляют на 3 - 4 часа, периодически перемешивая. Растворитель отделяют от водной фазы в делительной воронке и сливают через слой безводного сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя. Экстракцию повторяют 2 x 50 мл хлороформом. Объединенный экстракт выпаривают досуха на роторном испарителе и переносят ацетонитрилом на пластинку. 

2.5.2. Условия хроматографирования 

Пластинку "Силуфол" с нанесенными пробами и стандартами картолина-2 известных количеств помещают в хроматографическую камеру со смесью гексан:ацетон в соотношении 15:12. После поднятия фронта растворителя на 10 - 12 см пластинку достают и сушат на воздухе. 

Пластинки проявляют водно-аммиачным раствором азотнокислого серебра или реактивом Эрлиха. При проявлении раствором азотнокислого серебра пластинку предварительно помещают под УФ-лампу на 30 - 40 мин. После опрыскивания реактивом Эрлиха пластинку нагревают в сушильном шкафу при 120 °C в течение 15 - 20 мин. 

Картолин-2 проявляется с R = 0,66 +/- 0,02 в виде коричневых 

пятен при проявлении водно-аммиачным раствором азотнокислого 

серебра и ярко-желтых - при проявлении реактивом Эрлиха. 

 

2.6. Обработка результатов анализа 

 

Количество препарата в пробе определяют сравнением площадей пятна пробы и стандартных растворов по формуле: 

 

X = -, 

 

где: 

X - содержание препарата в пробе, мкг/г, мкг/мл; 

A - количество препарата, найденное путем сравнения со стандартами, мкг; 

P - масса (объем) пробы, взятая для анализа, г, мл. 

 

3. Требования техники безопасности 

 

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами. 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru