Законодательство СССР




Поиск документов на сайте

Утверждены 

Министерством здравоохранения СССР 

29 июля 1991 г. N 6078-91 

 

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИВИНА 

В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ 

 

(Дополнение к "Методическим указаниям по хроматографическому 

определению ивина в воде и овощах" N 4327-87 от 08.06.87) 

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. 

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. 

 

1. Краткая характеристика препарата 

 

Краткую характеристику препарата ивин см. во Временных методических указаниях. 

 

2. Методика определения ивина в биологическом материале 

 

2.1. Основные положения 

 

2.1.1. Принцип метода 

Методика основана на извлечении ивина из проб органическим растворителем, кислотной очистке экстрактов, реэкстракции препарата и хроматографировании в тонком слое силикагеля. Зоны локализации препарата обнаруживаются: водным раствором крахмала после УФ-облучения и обработки пластинок парами иода, альтернативно реактивом Паули после УФ-облучения. 

2.1.2. Избирательность метода 

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии близких по области применения и структуре следующих соединений: гидрела, дигидрела, хлорхолинхлорида, морфола, морфонола, алара, гибберелина и некоторых производных пиридина-нитрапирина, 6-хлорпиколиновоЙ кислоты, 2-пиколиновой кислоты, 2,6-дипиколиновой кислоты, 2,6-лутидина. 

2.1.3. Метрологическая характеристика методики (n = 20, P = 0,95) 

 

¦Анализируемый¦ Метрологические параметры ¦ 

¦ объект +TTTT+ 

¦ ¦ предел ¦ диапазон ¦среднее ¦стандартное¦доверитель- ¦ 

¦ ¦обнаружения,¦ опреде-х ¦значение ¦отклонение,¦ный интервал¦ 

¦ ¦ мкг/г (мл) ¦ концен-й, ¦% опреде-¦ % ¦среднего, % ¦ 

¦ ¦ ¦мкг/г (мл) ¦ления ¦ ¦ ¦ 

+++++++ 

¦Печень ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦84,5 ¦+/- 2,4 ¦+/- 5,2 ¦ 

¦Почки ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦81,7 ¦+/- 2,2 ¦+/- 4,7 ¦ 

¦Легкие ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦83,8 ¦+/- 2,4 ¦+/- 5,0 ¦ 

¦Мозг ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦82,1 ¦+/- 1,9 ¦+/- 4,0 ¦ 

¦Селезенка ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦85,7 ¦+/- 2,5 ¦+/- 5,3 ¦ 

¦Сердце ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦84,7 ¦+/- 2,1 ¦+/- 4,5 ¦ 

¦Кровь ¦0,2 ¦0,2 - 2 ¦86,4 ¦+/- 2,2 ¦+/- 4,7 ¦ 

¦Моча ¦0,4 ¦0,4 - 2 ¦78,6 ¦+/- 2,1 ¦+/- 4,5 ¦ 

¦Кал ¦0,4 ¦0,4 - 2 ¦77,7 ¦+/- 1,5 ¦+/- 3,2 ¦ 

L+++++ 

 

2.2. Реактивы и материалы 

 

Ивин, хч. Стандартный раствор в хлороформе, содержащий 100 мкг/мл действующего вещества, хранить в холодильнике не более 3-х месяцев. 

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74. 

Натр едкий, хч, ГОСТ 4328-77, 15-процентный водный раствор. 

Кали едкий, хч, ГОСТ 4203-65, 10-процентный водный раствор. 

Хлористоводородная кислота, ч, ГОСТ 3118-77, 1М водный раствор. 

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-76. 

Пластинки хроматографические "Силуфол" UV-254 (ЧССР). 

Бензол, хч, ГОСТ 5955-69. 

Уксусная кислота лед., ГОСТ 61-75. 

Иод кристаллический, чда, ГОСТ 4139-79. 

Крахмал, ГОСТ 10163-76, 1-процентный водный раствор. 

Сульфаниловая кислота, чда, ГОСТ 5821-78. 

Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 4197-74. 

Спирт этиловый, хч, ТУ 6-1710-77. 

Диэтиловый эфир, ч, ГОСТ 6265-74. 

 

2.3. Приборы, аппаратура, посуда 

 

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74. 

Прибор для отгонки растворителей, ТУ 25-11-917-76, тип ИР-1М. 

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл. 

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 100 мл. 

Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на 100 мл. 

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 250 мл. 

Воронки химические, ГОСТ 25336-82. 

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл. 

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емк. 50, 100 мл. 

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82. 

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82. 

Фильтры бумажные "синяя лента". 

Камера с парами иода (10 - 20 г кристаллического иода помещают на дно герметически закрытой камеры). 

 

2.4. Подготовка к определению 

 

Приготовление проявляющего реактива Паули: к раствору 25 г сульфаниловой кислоты в 125 мл 10-процентного раствора кали едкого добавляют (при охлаждении) 100 мл раствора нитрита натрия, 40 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 20 мл воды. Полученную соль промывают последовательно ледяной водой, этанолом, диэтиловым эфиром и высушивают. При хранении в темной склянке в холодильнике соль устойчива несколько месяцев. Для опрыскивания готовят 0,1 г диазониевой соли в 20 мл 15-процентного раствора едкого натра. Раствор готовят перед употреблением. 

 

2.5. Описание определения 

 

2.5.1. Экстракция и очистка 

5 г измельченного биологического материала (мозг, печень, почки, легкие, кал, сердце, селезенка) или 5 мл крови, мочи помещают в плоскодонную колбу и экстрагируют хлороформом трижды по 20 мл. Объединенные экстракты отфильтровывают через бумажный фильтр с безводным сернокислым натрием в колбу для выпаривания. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 60 °C. К сухому остатку добавляют 10 мл 1М раствора хлористоводородной кислоты, тщательно смывая остаток со стенок колбы. Раствор фильтруют через фильтр "синяя лента" в делительную воронку. Колбу еще дважды ополаскивают по 5 мл 1М раствором хлористоводородной кислоты и сливают в ту же воронку. 

Кислотный экстракт нейтрализуют 15% раствором едкого натра и реэкстрагируют ивин хлороформом 3 x 30 мл. Хлороформный экстракт высушивают безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 60 °C. 

2.5.2. Хроматографирование и проявление 

После отгонки растворителя остаток с помощью хлороформа количественно наносят на пластинку "Силуфол" (ЧССР) на расстоянии 1 см от нижнего края пластины. Сначала хроматографирование проводят в бензоле. При этом ивин остается на старте, а примеси, содержащиеся в пробе, продвигаются вверх. Пластинку высушивают на воздухе и проводят вторичное хроматографирование в том же направлении в смеси бензол - уксусная кислота в соотношении 1:1,5. После хроматографирования пластинку высушивают и выдерживают под ртутно-кварцевой лампой в течение 10 - 15 минут. 

Затем пластинку или помещают в камеру с парами иода и 

обрабатывают раствором крахмала, или сразу обрабатывают реактивом 

Паули. Зоны локализации ивина обнаруживаются в виде синих пятен 

(пары иода - крахмала) или в виде розовых пятен (реактив Паули) с 

величиной R 0,58 +/- 0,02. 

 

2.6. Обработка результатов анализа 

 

Количественная оценка проводится путем сравнения площадей и интенсивности окраски проб и стандартных растворов. 

Содержание ивина в пробе определяют по следующей формуле: 

 

A x S 

X = ------, 

P x S 

 

где: 

X - содержание ивина в пробе, мг/г (мл); 

A - количество ивина, содержащегося в пятне стандартного 

раствора, мкг (в диапазоне линейности); 

S - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 

S - площадь пятна пробы, кв. мм; 

P - количество анализируемой пробы, г (мл). 

 

3. Требования техники безопасности 

 

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81). 

 

 

 

Форум
Открылся форум WorkLib.ru